Practica Qigong în boli autoimune

MODIFICARI APARUTE IN SECRETIA DE CITOCHINE LA SUBIECTII SANATOSI CARE PRACTICA QIGONG-UL GUOLIN: STUDIU PILOT

(în format pdf studiul_BMC)

Brian M Jones

Sectia de Imunologie Clinica, Spitalul Regina Maria, Pokfulam, Hong Gong

email: bmjones@ha.org.hk

Primit: 6 august 2001, Acceptat: 18 octombrie 2001, Publicat: 18 octombrie 2001

BMC Medicina Complementara si Alternativa 2001, 1:8

Versiunea electronica a articolului este completa si poate fi gasita online la

http://www.biomedcentral.com/1472-6882/1/8

© 2001 Jones; licenta BioMed Central Ltd.

Rezumat

Prezentare: Guolin Qigong este o combinatie intre meditatie, respiratie controlata si miscare fizica, menita sa controleze energia vitala a corpului (Qi) si, in consecinta, sa imbunatateasca sanatatea fizica, mentala si spirituala. Practica Qigong-ului este cunoscuta ca avand efect in corectarea functiei imunologice a organismului, dar au fost efectuate putine studii care sa arate influenta asupra citochinelor, regulatorii cheie ai imunitatii.

Metoda: Numarul celulelor secretoare de citochine din sangele periferic a fost determinat prin metoda ELISPOT (Enzyme-linked immunosorbent spot) la 19 voluntari sanatosi cu varste cuprinse intre 27 si 55 ani, inainte sa fie invatati sa practice Qigong si in saptamanile a 3-a, a 7-a si a 14-a de practica zilnica. De asemena, a fost examinat efectul Qigong-ului si asupra secretiei de cortizol.

Rezultate: Numarul celulelor secretoare de IL4 si IL12 a ramas constant. IL6 a crescut in saptamana a 7-a si TNFα a crescut in saptamana a 3-a si a 7-a in culturile nestimulate, dar a scazut in acest timp in culturile stimulate cu lipopolizaharide (LPS) si Staphylococcus Aureus Cowan (SAC). De un interes deosebit a fost cresterea celulelor secretoare de IFNγ si scaderea celulelor secretoare de IL10 in culturile stimulate cu phytohemaglutinina (PHA), rezultand o crestere semnificativa a raportului IFNγ/IL10. Cortizolul, cunoscut ca inhibitor al productiei de citochine de tip 1, a fost redus prin practicarea Qigong-ului.

Concluzii: Aceste studii preliminare ale subiectilor sanatosi, desi nu sunt neaparat reprezentative pentru populatia sanatoasa si nu includ un grup separat de control, au indicat ca nivelul sanguin al cortizolului, hormonul legat de stres, poate fi scazut prin practica Qigong-ului pe perioade scurte, iar numarul celulelor secretoare de citochine prezinta modificari concomitente. Studiile ulterioare ale efectelor Qigong-ului pe pacienti cu boli clinice cunscute a fi asociate cu predominanta tipului 2 de citochine ar fi bine-venite.

Prezentare

Guolin Qigong este o combinatie intre meditatie, respiratie controlata si miscare fizica. Aceste exercitii sunt menite sa dezvolte abilitatea de a controla energia vitala a  corpului (Qi) si, in consecinta, sa imbunatateasca sanatatea fizica, mentala si spirituala.

Expertii afirma ca pot sa foloseasca Qi-ul emis pentru a modifica activitatea celulelor: “Qi-ul facilitator” stimuleaza cresterea celulara, in timp ce “Qi-ul inhibitor” reprima cresterea culturilor de celule tumorale [1].

Guolin Qigong a fost introdus cu mai mult de 50 de ani in urma, de catre doamna Guo, o supravietuitoare pe termen lung a cancerului, care a infiintat o retea de grupuri auto-intretinute in toata China si chiar mai departe. Se spune ca aceasta forma de Qigong, caracterizata prin exercitii lente de mers, insotite de miscari ale bratelor, coordonate cu o usoara rotire a taliei, este in mod particular utila pentru pacientii bolnavi de cancer. Printre organele ce par sa fie influentate de practica Qigong-ului sunt creierul, inima, rinichii si sistemul imunitar, fiind relatate efecte obtinute in senilitate, hipertensiune arteriala, accidente vasculare cerebrale, astm, biochimia sangelui si cancer [2-6]. (a se vedea si http://www.goldenflower.org/reflib/articles/tc_as_treatment.shtml).

Efectele relatate ar putea fi intermediate de sistemul imunitar care, la randul lui, ar fi influentat de catre energia Qi. Cu toate acestea, sunt doar cateva publicatii, atent revizuite, care descriu modificari in activitatea sistemului imunitar ca rezultat al practicii Qigong-ului. Raspunsurile de hipersensibilitate cutanata intarziata au fost mai rapide, mai puternice si mai numeroase in grupul de practicanti Qigong decat in grupul normal de subiecti sanatosi, nepracticanti [7].

La pacientii cu anemie aplastica tratati prin Qigong, s-au evidentiat cresteri semnificative ale raportului limfocitelor-T CD4/CD8 [8], raport care a crescut de asemenea la noii practicanti de Qigong, dupa 5 luni de antrenament [9]. Raportul celulelor T CD4/CD8 si activitatea celulelor NK au avut tendinta de crestere in timpul unei singure sedinte de Qigong cu durata de 40 minute [10]. Variate studii nerevizuite au descris stimularea functiilor limfocitelor, neutrofilelor si celulelor natural killer (NK) la subiectii care practica Qigong [a se vedea Extinderea Vietii: documentarea efectelor Qigong-ului (publicat de Zhang RM) Renming Tin Yue Press, China 1995; si http://www.goldenflower.org/reflib/articles/tc_as_treatment.shtml]

Citochinele sunt glicoproteine efectoare foarte labile, implicate in mod hotarator in caile aferente si eferente ale raspunsului imun, ca regulatori anti si pro-inflamatori. Tipul 1 de citochine, asa cum este interferonul gama (IFNγ), factorul de necroza tumorala alfa (TNFα) si interleuchina 12 (IL12), stimuleaza imunitatea mediata celular. Tipul 2 de citochine, din care fac parte IL4, IL6 si IL10, este antiinflamator si favorizeaza raspunsul mediat umoral [11,12]. Imunitatea mediata celular este importanta in protectia impotriva cancerului, in timp ce supraproductia de citochine antiinflamatorii are efect potential supresiv asupra imunitatii anticancer. Prezentul studiu pilot inentioneaza sa investigheze efectele Qigong-ului asupra productiei de citochine in vitro la voluntarii sanatosi si sa determine daca evaluarea ulterioara a efectelor Qigong-ului asupra profilului citochinelor la pacientii cu cancer ar fi valoroasa. A fost masurata productia celor 6 citochine de mai sus inainte de antrenamentul de Qigong si pana la 14 sapatamani de practica a exercitiilor. S-a constatat o crestere semnificativa a raportului IFNγ/IL10 in culturile stimulate cu PHA, indicand o crestere a citochinelor care favorizeaza imunitatea mediata celular.

Metoda

Subiectii investigati si evaluarile efectuate

19 subiecti chinezi sanatosi, cu varste cuprinse intre 27 si 55 ani (media 43,9 ± 7,8), dintre care 11 au fost femei, au fost recrutati prin anuntarea inceperii antrenamentului de Guolin Qigong. Unul dintre voluntari a fost ulterior exclus pe motive de sanatate. Fiecare dintre subiecti au participat la 6 lectii de Qigong, de cate 2 ore fiecare, intr-o perioada de 2 saptamani. Apoi, au practicat exercitiile zilnic, notandu-si in jurnal detaliile aparute. 10 subiecti inca practicau Qigong la sfarsitul perioadei de studiu (14 saptamani de la incepera antrenamentului), in timp ce 9 au intrerupt practica la 10 saptamani. Tensiunea arteriala, frecventa pulsului, cortizolemia si productia de IFNγ, IL4, IL6, IL10, IL12 si TNFα au fost masurate inainte de antrenament si in saptamanile 3, 7 si 14. Unul dintre subiecti a fost exclus din studiul principal din cauza unei infectii respiratorii in a 3-a saptamana, dar a fost inclus in cea de a 14-a saptamana, pentru a compara subiectii care au terminat studiul cu cei care s-au oprit, infectia vindecandu-se deja la acea vreme.

Testul ELISPOT

Numarul celulelor secretoare de citochine (CK-SC) in culturile nestimulate sau stimulate cu activatori ai celulelor-T (phytohemaglutinina (PHA), concavalina (Con A), anti-CD3 in faza solida) sau activatori ai monocitelor (lipopolizaharide E. coli (LPS), Staphylococcus Aureus Cowan (SAC)) au fost determinate folosind testul ELISPOT [13,14]. Au fost descrise detaliile de adaptare a aceastei metode, specificitatea si reproductibilitatea sa [15-17]. Pe scurt, sangele heparinizat a fost prelucrat pentru evaluarile de citochine in decurs de o ora de la recoltare. Celulele mononucleare din sangele periferic (PBM) au fost separate cu Lymphoprep (Nycomed, Oslo, Norway) si adaugate in placile de filtru 96-well Multiscreen (Millipore, Bedford, MA, USA) care au fost in prealabil invelite cu anticorpi ce capteaza citochine (Pharmingen, San Diego, CA, USA) si blocate cu 5% ser fetal de vitel (FCS) in mediu RPMI 1640.

Culturile multiplicate cu 104 (pentru IL6 si TNFα) sau cu 105 (pentru IFNγ, IL4, IL10 si IL12) celule/godeu in mediu RPMI + 5% FCS cu sau fara stimulatori au fost incubate pentru 18–22 ore la 37°C in 5% CO2. Celulele au fost apoi spalate si placile incubate secvential cu anticorpi anti-citochine detectati prin biotinilare (Pharmingen), streptavidin-fosfataza alcalina (Sigma, St. Louis, MO, USA) si 5-bromo-4-cloro-3- indolilfosfat-nitroblue tetrazolium (Calbiochem, La Jolla, CA, USA). Punctele albastre corespunzatoare fiecarei celule secretoare de citochine au fost numarate la microscop cu ajutorul unui ocular cu scara milimetrica ce acopera 1/8 sau 1/72 din suprafata culturii celulare. Rezultatele sunt exprimate in CK-SC/106 PBM.

Analiza statistica

Versiunea de software Prism 2.0 (GraphPad, San Diego, CA, USA) a fost folosita pentru a compara parametrii masurati inainte, la 3, 7 si 14 saptamani de antrenament, efectuand testul t pentru esantioane dependente (paired t-test), si pentru a compara rezultatele in a 14-a saptamana pentru subiectii care s-au oprit din practica Qigong-ului la 10 saptamani cu cei care au continuat practica si dupa cele 14 saptamani, efectuand testul t pentru esantioane independente (unpaired t-test).

Rezultate

Nu s-a inregistrat nici o modificare semnificativa in valorile tensiunii arteriale sistolice sau diastolice pe perioada studiului, dar frecventa cardiaca a scazut de la 76,3 ± 11,4 (media ± SD) inainte de antrenament la 69,8 ± 9,4 la 3 saptamani (p<0,05). Totusi, valorile in saptamanile 7 si 14 (71,4 ± 9,5 si respectiv 74,3 ± 13,3) nu au fost semnificativ diferite fata de linia de baza. Nivelul initial al cortizolului plasmatic a fost 394 ± 115 nmol/l si in saptamanile 3, 7 and 14 a fost 328 ± 126 nmol/l (p < 0.05), 376 ± 109 nmol/l (nesemnificativ) si respectiv 318 ± 110 nmol/l (p < 0.05).

IL4-SC stimulate cu PHA, anti-CD3 si Con A (Fig. 1A) si nestimulate, precum si IL12-SC stimulate cu PHA, anti-CD3 si SAC (Fig. 1B) au ramas constante inainte si dupa antrenamentul de Qigong. Nici o celula secretoare de IL4 (nici de IFNγ) nu a fost observata in culturile nestimulate, asa cum se constatase anterior [15-17].

IL6-SC au crescut semnificativ dupa saptamana a 7-a de exersare, in culturile nestimulate si in cele stimulate cu PHA si LPS, dar nu cu SAC si au revenit la linia de baza in saptamana a 14-a (Fig. 2A). TNFα-SC au crescut semnificativ in saptamanile 3 si 7 in culturile nestimulate si au revenit aproape de linia de baza in saptamana a 14-a.

Nu au fost cresteri semnificative ale TNFα-SC stimulate de activatori ai celulelor T sau ai monocitelor si, de fapt, TNFα-SC stimulate cu LPS si SAC au scazut semnificativ in saptamana a 14-a, comparativ cu valorile premergatoare antrenamentului (Fig. 2B). Scaderea IL6 si TNFα-SC intre saptamanile 7 si 14 ar putea fi datorata faptului ca aproximativ jumatate din subiecti s-au oprit din practica Qigong-ului in saptamana a 10- a. Aceasta scadere nu a fost valabila si pentru IL6, deoarece productia ei a fost similara la cei care au continuat practica si la cei care s-au oprit (Fig. 3A). Prin contrast, oprirea practicii a fost asociata cu nivele semnificativ mai joase de TNFα-SC nestimulate si stimulate cu PHA, comparativ cu continuarea Qigong-ului (Fig. 3B).

IFNγ-SC au fost semnificativ crescute in culturile stimulate cu PHA in saptamanile 3, 7 si 14. Con A si anti-CD3, inductori mai puternici de IFNγ, au stimulat producerea de citokine la nivele care au fost mai putin influentate de practica Qigong-ului, numai IFNγ- SC stimulat de Con A in a 3-a saptamana a fost semnificativ mai mare decat inainte de antrenament (Fig. 4A). Productia de IL10 in culturile nestimulate a crescut semnificativ dupa 7 saptamani de exercitii, dar a revenit la nivelul premergator antrenamentului in saptamana a 14-a. IL10-SC stimulate cu PHA, LPS si SAC au fost similare celor preantrenament in saptamanile a 3-a si a 7-a si mai joase in saptamana a 14-a, cu IL10-SC induse de PHA semnificativ mai scazute decat inainte de antrenament (Fig. 4B).

Raportul IFNγ/IL10-SC in culturile stimulate cu PHA a fost semnificativ mai mare in saptamanile 3, 7 si 14 decat inainte de antrenament (Fig. 4C). IFNγ-SC, IL10-SC si raportul IFNγ/IL10-SC in culturile stimulate cu PHA, in saptamana a 14-a, nu au fost semnificativ diferite la subiectii care au oprit exercitiile de Qigong in saptamana a 10-a comparativ cu cei care le-au continuat mai mult de 14 saptamani (Fig. 5).

Discutii

Qigong-ul a fost practicat in China de peste 3.000 de ani si exista dovezi ale efectelor sale benefice in mentinerea si imbunatatirea sanatatii, dar care au fost prezentate pe larg in jurnale inaccesibile pentru occident. Folosirea pe scara mai larga a Qigong-ului ar putea contribui la existenta unei populatii mai sanatoase si mai putin dependente de medicamentele moderne, al caror cost creste in spirala. Daca s-ar identifica mecanismele prin care Qigong-ul realizeaza aceste beneficii, aplicatii mai concrete ale exercitiilor si ale energiei Qi ar putea sta la baza unor terapii general acceptabile, care sa suplimenteze practicile curente.

Prezentul studiu incearca sa determine daca citochinele, reglatorii cheie ai sistemului imunitar, sunt influentate de practica Qigong-ului. Am ales sa evaluam productia de citochine folosind testul ELISPOT pentru ca se masoara mai precis secretia reala de citochine decat prin proteinele citoplasmatice (masurate prin flowcitometrie) sau prin amplificarea mesajului (reactia in lant a polimerazei – revers transcriptaza, RT-PCR) si este evitata problema neutralizarii citochinelor prin secretia concomitenta de antagonisti sau receptori solubili, care afecteaza masurarea citochinelor in culturile de supernatant.

Testul ELISPOT utilizat in laboratorul nostru este senzitiv, specific (nu se produce nici o modificare de culoare atunci cand sunt folositi pentru captura si detectie anticorpi anti-citochine incompatibili) si reproductibil, cu coeficienti de variatie (CV) in interiorul testului de 8,8 ± 5,8% ale datelor combinate pentru IFNγ, TNFα, IL4, IL6, IL10, IL12 si toti stimulii [15]. Variatia intre teste este 13,2 ± 4,9%, reflectand variatii individuale considerabile de la o zi la alta, dar atunci cand grupurile de subiecti sunt evaluate in anumite momente, valorile medii variaza numai cu 5,3 ± 3,8% [15]. Aceasta variatie este acceptabila pentru studierea efectelor interventiilor in grupurile de subiecti.

Toti voluntarii recrutati ai fost normotensivi inainte de antrenament, iar practica Qigong-ului Guolin pentru cel putin 10 saptamani nu a modificat foarte mult tensiunea arteriala. Frecventa cardiaca a fost mai mica decat valoarea de referinta in a 3-a saptamana, dar nu si in saptamanile a 7-a sau a 14-a. Este interesant ca scaderea nivelului de cortizol a fost bifazica, cu revenire la valorile premergatoare antrenamentului in saptamana a 7-a, in ciuda reducerilor semnificative din saptamanile a 3-a si a 14-a.

Nu au fost diferente semnificative intre cortizolemia celor care au oprit exersarea in saptaman a 10-a si a celor care au continuat. Este posibil ca practica Qigong-ului sa fi imbunatatit abilitatea voluntarilor de a face fata stresului, abilitate care s-a mentinut chiar si dupa ce exersarea a fost intrerupta. Aceasta posibilitate necesita cercetari ulterioare.

Studiile anterioare au aratat ca productia in vitro de IFNγ, IL12 si TNFα este inhibata de cortizol, iar aceste citochine sunt corelate negativ cu nivelul cortizolului plasmatic [18]. Administrarea cortizonului acetat scade raportul IFNγ/IL10 cu >70% [19]. Ne putem astepta ca imbunatatirea reactiei la stres sa scada cortizolemia si sa favorizeze producerea tipului 1 de citochine in defavoarea tipului 2. Subiectii cercetati au prezentat o crestere semnifiactiva a IFNγ si o reducere a IL10-SC in culturile stimulate cu PHA foarte curand, la 3 saptamani, cu o crestere chiar si mai mare in saptamana a 14-a. Acest efect a ramas vizibil la 14 saptamani, chiar si la subiectii care au oprit exersarea la 10 saptamani.

Totusi, raspunsul in directia producerii tipului 1 de citochine nu a fost observat in cazul tuturor stimulilor in vitro. Cresterile in productia de IFNγ dupa antrenamentul de Qigong au fost mai putin vizibile atunci cand s-a folosit Con A sau anti-CD3 in faza solida. Productia de IL10 mai curand a crescut decat sa scada in saptamana a 7-a, in culturile nestimulate si a fost doar o tendinta catre scaderea productiei de IL10 in saptamana a 14-a, in culturile stimulate cu LPS sau SAC. Mai mult, nu s-au inregistrat efecte remarcabile ale Qigong-ului asupra IL12, inductorul cheie al IFNγ si al tipului 1 de citochine [20], nici asupra IL4, elementul central al tipului 2 de citochine [21].

IL6-SC, stimulate si nestimulate, au crescut semnificativ in saptamana a 7-a, sugerand ca un eveniment inflamator tranzitor a aparut in acea perioada. Cortizolemia a crescut de la nivelul scazut al saptamanii a 3-a si apoi scade din nou in saptamana a 14-a, ceea ce ar putea indica o crestere a nivelului de stres in perioada respectiva, datorat unei cauze necunoscute. Totusi, DeRijk [22] a gasit ca nivelurile de cortizol crescute fiziologic prin exercitii intense nu au efect asupra IL6 stimulate cu LPS, iar nivelurile de cortizol crescute farmacologic au efect inhibitor.

TNFα-SC au crescut peste valorile de baza in culturile nestimulate in saptamanile 3 si 7, apoi au revenit la normal in saptamana a 14-a la subiectii care au oprit practicarea exercitiilor la 10 saptamani. A fost o tendinta similara, dar nesemnificativa, in culturile sitmulate cu PHA, in timp ce in culturile stimulate cu activatori ai monocitelor, nivelul TNFα a scazut in saptamana a 14-a, chiar si la subiectii care au oprit practica in saptamana a 10-a.

Spre deosebire de IL6, TNFα este sensibil la cresterile cortizolemiei induse fiziologic [22], dar rezultatelle noastre sugereaza ca, daca modificarile TNFα observate in studiu se datoreaza nivelului fluctuant al cortizolului, atunci stimularea TNFα de catre activatorii celulelor T si stimulii in vivo poate fi influentata de cortizol intr-un mod diferit decat cel indus de activatorii monocitelor.

Concluzii

Pentru mentinerea sanatatii, este necesar un echilibru intre tipurile 1 si 2 de citochine, o preponderenta a primului fiind asociata cu boli autoimune specifice ale organelor, iar a celui de-al doilea cu alergii, boli autoimune sistemice si inhibarea raspunsului imun la virusuri si cancer [23]. Rezultatele preliminarii ale unui studiu mic, nerandomizat si necontrolat, prezentat aici, arata ca Qigong-ul Guolin poate modifica productia de citochine la subiectii sanatosi in directia tipului 1 de raspuns imun. Nu exista nici o dovada pana in prezent care sa indice daca aceasta modificare ar fi benefica prin intarirea protectiei impotriva cancerului si astmului, de exemplu, nociva prin eventuale complicatii ulterioare, cum ar fi bolile autoimune, sau fara efect pentru ca modificarile induse au fost relativ minore. Sunt necesare studii ulterioare ale efectelor Qigong-ului si ale variatelor lui componente, observand parametri clinici, imunologici si fiziologici in diferite patologii.

Recunostinte

Acest studiu a fost initiat de Dr. Vivian Wong, director executiv la Spitalul Regina Maria, si a fost sustinut de Fundatia Li Ka Shing din Hong Kong. Sunt recunoscator Dr. Janette Kwok pentru traducerea si rezumatul studiului din chineza, doamnei Jacqueline Yuen, care a organizat si efectuat recoltarile hematologice de la voluntari, Dr. Daniel Fong, care ne-a ajutat cu analizele statistice, Dr. Jonathan Sham si Dr. Peter Lee pentru discutiile utile.

Referinte

1. Chien CH, Tsuei JJ, Lee SC, Huang YC, Wei YH: Efectul emiterii bioenergiei asupra functiilor biochimice ale celulelor. Am J Chin Med 1991, 19:285-292.

2. Sander KM, Hu B: Aplicatiile medicale ale Qigong-ului si ale emiterii Qi-ului asupra oamenilor, animalelor, culturilor de celule si plante: revizuirea unor studii stiintifice selectate. Am J Acupunct 1991, 19:367-377.

3. Sander KM: Aspecte medicale ale Qigong-ului. Alternative Therapies 1996, 2:40- 46.

4. Wang C, Xu D, Qian Y: Qigong-ul Medical. J Trad Chin Med 1991, 11:296-301.

5. Reuther I, Aldridge D: Qigong-ul Yangsheng ca terapie complementara in managementul astmului. J Altern Complement Med 1998, 4:173-183.

6. Kuang A, Wang C, Xu D, Qian Y: Cercetare asupra efectului de “anti-imbatranire” al Qigong-ului. J Trad Chin Med 1991, 11:224-227.

7. Ryu H, Mo HY, Mo GD, Choi BM, Jun CD, Seo CM, Kim HM, Chung HT: Reactia de hipersensibilitate cutanata intarziata la practicantii de Qigong (chun do sun bup) studiata prin sistemul multitest al imunitatii mediate celular.Am J Chin Med 1995, 23:139-144.

8. Yao BS: Studiu preliminar asupra modificarilor in subseturile de celule T la pacientii cu anemie aplastica tratati prin Qigong. Chung His I Chieh Ho Tsa Chih 1989, 9:341-342.

9. Ryu H, Jun CD, Lee BS, Choi BM, Kim HM, Chung HT: Efectul antrenamentului de Qigong asupra proportiei de limfocite T in sangele periferic. Am J Chin Med 1995, 23:27-36.

10. Higuchi Y, Kotani Y, Hibuchi H, Minegishi Y, Itami J, Uh T, Manda Y: Modificarile endocrine si imunologice in timpul Noului Qigong al lui Guolin. J Intl Soc Life Info Science, 1997, 15:138.

11. Mosmann TR, Cherwinski H, Bond MW, Giedlin MA, Coffman RL: Doua tipuri de clone murine ale celuleor T helper. I. Definitie in functie de profilul activitatii limfochinelor si al proteinelor secretate. J Immunol 1986, 136:2348-2357.

12. Romagnani S: Productia de limfochine de catre celulele T umane in starile de boala. Ann Rev Immunol 1994, 12:227-257.

13. Czerkinsky C, Nilsson LA, Nygren H, Ouchterlony O, Tarkowsky A: Testul punctelor imune legate enzimatic pe suport solid (ELISPOT) pentru numararea celulelor secretoare de anticorpi specifici. J Immunol Methods 1983, 65:109-121.

14. Sedgwick JD, Holt PG: Tehnica imuno-enzimatica pe suport solid pentru numararea celulelor secretoare de anticorpi specifici. J Immunol Methods 1983, 65:301-309.

15. Jones BM, Kwok CCH, Kung AWC: Efectul terapiei cu iod radioactiv asupra productiei de citochine in boala Graves. Cresteri tranzitorii ale IL4, IL6, IL10 si TNFα, cu cresteri pe termen lung a productiei de IFNγ. J Clin Endocrinol Metabol 1999, 84:4106-4110.

16. Jones BM, Liu TF, Wong RWS: Reducerea in vitro a productiei de IFNγ, IL4, IL12 si cresterea productiei de IL6, IL10, TNFα in lupusul eritematos sistemic. Slabe corelatii ale productiei de citochine cu activitatea bolii. Autoimmunity 2000, 31:117-124.

17. Jones BM, Kwok JSY, Kung AWC: Modificari in productia de citochine in timpul graviditatii la pacientele cu boala Graves. Thyroid 2000, 10:701-707.

18. Petrovsky N, McNair P, Harrison LC: Ritmul diurn al citochinelor proinflamatorii: reglarea prin cortizolul plasmatic si implicatiile terapeutice. Cytokine 1998, 10:307-312.

19. Petrovsky N, Harrison LC: Ritmul diurn al productiei de citochine umane: un dezechilibru dinamic intre celulele T helper de tip 1 si 2? J Immunol 1997, 158:5163-5168. [PubMed Abstract]

20. Trinchieri G: IL12: o citochina proinflamatorie cu functii imunoreglatorii, care face legatura intre rezistenta innascuta si imunitatea dobandita cu specificitate antigenica. Ann Rev Immunol 1995, 13:251-276.

21. Seder RA, Paul WE: Aparitia fenotipului producator de limfochine la celulele CD4+. Ann Rev Immunol 1994, 12:635-673.

22. DeRijk R, Michelson D, Karp B, Petrides J, Galliven E, Deuster P, Paciotti G, Gold PW, Sternberg EM: Exersarea si variatiile circadiene ale cortizolului plasmatic regleaza productia de IL1β, IL6 si TNFα: senzitivitatea crescuta a TNFα si rezistenta IL6. J Clin Endocrinol Metabol 1997, 82:2182-2191.

23. Romagnani S: Paradigma Th1/Th2. Immunol Today 1997, 18:263-266.

Lasă un răspuns

Completează mai jos detaliile despre tine sau dă clic pe un icon pentru autentificare:

Logo WordPress.com

Comentezi folosind contul tău WordPress.com. Dezautentificare / Schimbă )

Poză Twitter

Comentezi folosind contul tău Twitter. Dezautentificare / Schimbă )

Fotografie Facebook

Comentezi folosind contul tău Facebook. Dezautentificare / Schimbă )

Fotografie Google+

Comentezi folosind contul tău Google+. Dezautentificare / Schimbă )

Conectare la %s

%d blogeri au apreciat asta: